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供应商 上海卓汉生命科技有限公司
孙经理

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“WI-38贴壁培养细胞株哪提供”详细信息
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WI-38贴壁培养
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WI-38贴壁培养
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WI-38贴壁培养细胞株哪提供

WI-38贴壁培养细胞株哪提供 "

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细胞培养相关培养基选购基本指南:
如何选择培养基:经常听到有人问,这种细胞该用哪一种培养基呢?其实这个问题的答案可以很简单,也可以好复杂。为什么这样说呢?如果这种细胞是购自一些细胞库,那很简单,问供应商就行了。或者找到相关的文献,作为参考。
培养基这么多种,要选择起来也是个头疼的事情。除了部分培养基是公开配方的,或者是针对某一种细胞的,如昆虫基本培养基和神经祖细胞基础培养基, 但是大部分液体培养基都是专利配方的,也就是说其中的成分是保密的。那么你只能是检索文献、让供应商推荐,然后用自己的细胞做几次传代培养来选出合适的培养基。毕竟实践出真知。
怎么样才可以买到好的培养基产品:,当然需要找对品牌,其次是找对自己所在区域的品牌代理商,针对自己所养的细胞,咨询供应商该选用哪种的培养基进行培养,这样就可以买到好的而且适合自己的培养基产品。
关于培养基品牌,目前公司所知道的高校实验室有些同学在用Corning系列培养产品,也有同学在用Invitrogen(GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)等品牌的产品。
培养基的选择和使用
MEM:成分简单,贴壁细胞。
DMEM:分高糖型和低糖型。
IDMEM:适合细胞密度低,生长困难的细胞。如杂交细胞的筛选,DNA转染后转化细胞的筛选培养。
RPM1640:应用广泛的培养基之一。悬浮细胞培养,主要针对淋巴细胞,也适合其他细胞。
199、109培养基:成分,培养效果较好。
F10培养基:适合小鼠及人类二倍体细胞培养。
F12培养基:适合单细胞分离培养及无血清培养。
McCoy’s5A培养基:特别适合原代细胞及较难培养细胞的生长。" "

有关实验室细胞培养基知识普及:
经典的培养基有很多种,Corning、Invitrogen(GIBCO)、Thermo Fisher(HyClone)等公司都可以提供。其中DMEM、RPMI 1640、MEM、DMEM/F12都是应用广泛的培养基。其他如M199、IMDM、L15培养基等也用于某些细胞的培养。
MEM是由Eagle’s基础培养基(BME)发展而来的,其中增加了组分的范围及浓度。
BEM(DMEM)培养基是为小鼠成纤维细胞设计的,现在常用于贴壁细胞的培养。DMEM的氨基酸浓度是MEM的两倍,维生素浓度是MEM的4倍,采用双倍的HCO3-和CO2浓度起到更好的缓冲作用。初的配方中葡萄糖含量为1000 mg/L,后来为了某些细胞的生长需要,将葡萄糖含量又调整为4500 mg/L,这就是大家常说的低糖和高糖了。
aMEM含有附加的氨基酸、维生素以及核苷和脂肪酸,它可广泛应用于各种细胞类型,包括对营养成分要求苛刻的细胞。
Ham’s F12是为在低血清浓度下克隆CHO细胞而设计的,现在也广泛应用于克隆形成率的分析及原代培养。F12还可以与DMEM等体积混合使用,得到一种高浓度与成分多样化相结合的产物,这种培养基已应用于许多原代培养及更难养的细胞系的培养。
RPMI 1640培养基是专为淋巴细胞培养而设计的,现在已广泛应用于悬浮细胞的培养。
干粉培养基:以前大部分实验室都是用干粉培养基,但配制过程就较为繁琐,要溶解、调pH值,过滤,过程中可能会产生一些浓度误差,而且有些实验室的水质并不理想,所以培养的效果会有差异。如果使用液体培养基,这种人为的误差会减少,因为毕竟是大批量工业化生产的,批间差会很小。大家是不是感觉液体培养基会贵很多,以前是这样,但现在大家都认同了。
无血清培养基(Serum-Free Media),通常以SFM表示,顾名思义,就是在细胞培养中不需要添加血清,但是在某些应用中可能要添加生长因子或细胞因子。无血清培养基中添加了血清的主要成分:粘附因子、生长因子、必需的营养物质和激素等,能减少上述血清带来的不利因素,使细胞培养的条件更稳定。但它也不是的,从有血清培养过渡到无血清培养的条件并不像想象中那么直截了当。处于发育的不同分化阶段的细胞(例如干细胞与定向前体细胞相比)需要不同的配方,对生长因子和细胞因子的选择尤为重要。而且在去除血清的同时,也去除了一些血清蛋白具有的保护、作用,因此对试剂、水的纯度和仪器清洁度的要求更高。另外,它的价格也比普通的培养基贵很多。" "

细胞传代培养的胰酶消化法:
传代培养:是指细胞从一个培养瓶以1:2或1:2以上的比例转移,接种到另一培养瓶的培养。传代细胞,可根据不同细胞采取不同的方法进行细胞传代。贴壁生长的细胞用消化法传代,部分贴壁的细胞用直接吹打或用硅胶软刮的刮除法传代。悬浮细胞可采用加入等量新鲜培养基后直接吹打分散进行传代,或用自然沉降法加入新培养基后再吹打分散进行传代。
实验步骤:① 入无菌室之前用肥皂洗手,再用75% 的酒精擦拭消毒双手;
② 倒置显微镜下观察细胞形态,确定细胞是否传代及细胞需要稀释的倍数。将培养用液37℃下预热。
③ 超净台台面应整洁,用75%酒精棉球擦拭清洁;
④ 打开超净工作台的紫外灯照射台面20min左右,关闭紫外灯,打开风机清洁空气除去臭氧;
⑤ 点燃酒精灯;取出无菌试管,巴士德吸管和刻度吸管;安上橡皮头;过酒精灯火焰略烧后插在无菌试管内。
⑥ 将培养用液瓶口用75%酒精消毒,过酒精灯火焰后斜置于酒精灯旁的架子上。
⑦ 倒掉培养细胞的旧培养基。酌情可用2-3ml Hanks液洗去残留的就培养基,或用少量胰酶涮洗一下。
⑧ 每个大培养瓶加入1ml胰酶,小培养瓶用量酌减,盖好瓶盖后在倒置显微镜下观察。当细胞收回突起变圆时立即翻转培养瓶,使细胞脱离胰酶,然后将胰酶倒掉。注意勿使细胞提早脱落入消化液中。
⑨ 加入少量的含血清的新鲜培养基,反复吹打消化好的细胞使其脱壁并分散,再根据分传瓶数补加一定量的含血清的新鲜培养基(7-10ml/大瓶;3-5ml/小瓶)制成细胞悬液,然后分装到新培养瓶中。盖好瓶盖,适度拧紧后稍回转,以利于CO2的进入,将培养瓶放回CO2培养箱。
⑩ 对悬浮培养细胞,步骤7-9不做。直接将细胞悬液进行离心去除旧培养基上清,加入新鲜培养基,然后分装到各瓶中。
注意事项
① 传代培养时注意无菌操作并防止细胞间的交叉污染。所有操作尽量靠近酒精灯火焰。每次好只进行一种细胞的操作。每种细胞使用一套器材。
② 每天观察细胞形态,掌握好细胞是否健康的标准:健康细胞的形态饱满,折光性好,生长致密时即可传代。
③ 如发现细胞有污染迹象,应立即采取措施,一般应弃置污染的细胞,如果挽救,可加含有抗生素的BBS或培养基反复清洗,随后培养基中加入较大量的抗生素,并经常更换培养基。
传代细胞的建系和维持:细胞系的维持通过换液传代再换液、再传代和细胞种子冻存来实现。
对每一个细胞系来说都有其自身的特点,要做好建系的维持记录好细胞档案,换液传代和做好细胞系的管理工作。" "

公司已合作单位有广西医科大学、中山大学附属肿瘤医院、复旦大学、南方医科大学、浙江大学医学院附属邵逸夫医院、深圳市孙逸仙心血管医院、福建省立医院、上海宠乐道宠物医院、中国科学院上海高等研究院、北京市昌平区中西医结合医院、中国医学科学院肿瘤医院、云南中医学院、绍兴市人民医院、汕头大学医学院、首都医科大学附属北京同仁医院、解放军总医院、上海瑞金医院、北京宣武医院、吉林大学临床医院、北京中医药大学附属东直门医院、北京天坛医院、复旦大学附属肿瘤医院、河北医科大学第二医院、北京军区总医院、上海市中医医院、浙江省中医院、上海华山医院、哈尔滨医科大学附属医院、西安唐都医院、上海长征医院、广州珠江医院、上海仁济医院、山西省眼科医院、航天中心医院、中山大学肿瘤医院、重庆新桥医院、浙江大学附属第二医院、解放军总医院(301医院)、北京大学第三医院、广州军区广州总院、北京大学人民医院、山西医科大学第二医院、、广州中医药大学附属医院、宁波市第二医院、广州南方医院、西京医院、复旦大学附属中山医院、浙江大学医学院附属医院、重庆医科大学第二医院、北京地坛医院、北京大学医院、中山大学附属医院、天津市肿瘤医院、第二军医大学东方肝胆外科医院、北京肿瘤医院、湖南省肿瘤医院、南方医院、广东省人民医院、北京市广安门医院、北京同仁医院、复旦大学附属眼耳鼻喉科医院、上海仁济医院(西部)、山东大学齐鲁医院、海军总医院" "

C7074 HS445人霍奇金淋巴瘤
C7075 KARPAS299人间变性大四代细胞淋巴瘤四代贴壁形式细胞株
C7076 2PK-3小鼠B四代细胞淋巴瘤
C7077 L5178-R小鼠淋巴瘤贴壁形式细胞株
C7078 MDAH-2774人卵巢癌贴壁形式细胞株
C7079 OVCAR5人卵巢癌贴壁形式细胞株
C7080 OVCAR8人卵巢癌贴壁形式细胞株
C7081 OV3121小鼠卵巢颗粒四代细胞瘤
C7082 LN229人脑胶质四代细胞瘤
C7083 MBT-2人膀胱癌贴壁形式细胞株
C7084 T24/83人膀胱癌贴壁形式细胞株
C7085 RT112/84人膀胱上皮癌
C7086 Hs695T人恶性黑色素瘤贴壁形式细胞株
C7087 CYNOM-K1食蟹猴皮肤贴壁形式细胞株
C7088 C57/B1小鼠C57BL/6J黑色素瘤上皮
C7089 B16-F0小鼠黑色素瘤贴壁形式细胞株
C7090 CloudmanS91小鼠黑素瘤贴壁形式细胞株
C7091 JB6小鼠皮肤贴壁形式细胞株
C7092 22Rv.1人前列腺癌贴壁形式细胞株
C7093 LNCapFGC人前列腺癌贴壁形式细胞株
C7094 PNEC30小鼠前列腺癌贴壁形式细胞株
C7095 MDA-MB-330人浸润性小叶性
C7096 HMT-3522S1人类乳腺上皮贴壁形式细胞株
C7097 CAL-148人贴壁形式细胞株
C7098 COLO-824人贴壁形式细胞株
C7099 EFM-192A人贴壁形式细胞株
C7100 EFM-192B人贴壁形式细胞株
C7101 EFM-192C人贴壁形式细胞株
C7102 EVSA-T人贴壁形式细胞株
C7103 HDQ-P1人贴壁形式细胞株
C7104 JIMT-1人贴壁形式细胞株
C7105 MCF7人贴壁形式细胞株
C7106 MFM-223人贴壁形式细胞株
C7107 MRK-nu-1人贴壁形式细胞株
C7108 SUM102PT人贴壁形式细胞株
C7109 SUM1315MO2人贴壁形式细胞株
C7110 SUM149PT人贴壁形式细胞株
C7111 SUM159PT人贴壁形式细胞株
C7112 SUM190PT人贴壁形式细胞株
C7113 SUM44PE人贴壁形式细胞株
C7114 SUM52PE人贴壁形式细胞株
C7115 UACC893人贴壁形式细胞株
C7116 VP229人贴壁形式细胞株
C7117 VP267人贴壁形式细胞株
C7118 VP303人贴壁形式细胞株
C7119 HCC1008人乳腺导管癌
C7120 MDA-MB-175-VII人乳腺导管癌贴壁形式细胞株
C7121 MCF10A人正常乳腺上皮贴壁形式细胞株
C7122 Eph41424小鼠贴壁形式细胞株
C7123 FM3A小鼠贴壁形式细胞株
C7124 JC小鼠乳腺腺癌贴壁形式细胞株
C7125 C127I小鼠乳腺肿瘤贴壁形式细胞株
C7126 Cal27人舌头鳞癌贴壁形式细胞株
C7127 HEK293S人胚肾贴壁形式细胞株"
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